A água peptonada é utilizada em análises microbiológicas para o enriquecimento de microrganismos em amostras, geralmente em processos de detecção de patógenos ou contagem bacteriana em alimentos, bebidas e água.
A Composição típica (g / litro) Peptona de caseína, 10,0; cloreto de sódio 5,0; hidrogenofosfato dissódico dodeca 9,0; dihidrogenio fosfato de potássio 1,5.
A água peptonada da Merck, código 107228, é uma solução peptonada frequentemente usada como meio de diluição. Para o pré-enriquecimento não selectivo de bactérias patogênicas, particularmente Enterobacterias, a partir de produtos alimentares e outros materiais. Este meio de cultura está em conformidade com as recomendações da Norma Internacional ISO (ISO 6579-2002). Método horizontal para a detecção de Salmonella spp.
O caldo é rico em nutrientes e produz altas taxas de ressuscitação para bactérias injuriadas. O tampão fosfato evita danos bacterianos devido a alterações no pH do meio.
Aqui está o exemplo de um procedimento básico, com uso de água peptonada na análise microbiológica:
Procedimento de Análise com Água Peptonada (Merck 107228)
Materiais:
- Água Peptonada (Merck 1072280500) estéril.
- Amostras a serem analisadas (alimento, água, etc.).
- Placas de Petri com meio de cultura apropriado (ex.: Ágar MacConkey, Ágar Nutriente, etc).
- Pipetas.
- Incubadora.
Passo a Passo:
- Preparação da Água Peptonada:
- Suspender 25,5 g / l, se for o caso, dispensar em recipientes adequados, autoclavar (15 minutos a 121°C).
- pH: 7,0 ± 0,2 a 25 ° C.
- O caldo preparado é claro e amarelado.
- Diluição da Amostra:
- Série de Diluições Decimais:
- Se necessário, realizar diluições decimais seriadas (1:10, 1:100, 1:1000, etc.), transferindo 1 mL da diluição anterior para um novo tubo com 9 mL de água peptonada.
- Inoculação em Meio de Cultura:
- Pipetar 1 mL da diluição desejada em uma placa de Petri contendo o meio de cultura apropriado.
- Espalhar a amostra uniformemente na superfície do ágar (técnica de espalhamento) ou usar a técnica de incorporação, onde a amostra é misturada com o ágar antes da solidificação.
- Incubação:
- Incubar as placas em temperatura e tempo adequados. Para bactérias mesófilas, geralmente se usa uma incubação a 35-37°C por 24 a 48 horas.
- Contagem e Identificação:
- Após o período de incubação, contar as colônias formadas nas placas.
- Realizar a identificação de patógenos específicos, se necessário, usando métodos bioquímicos ou moleculares.
Observações:
- A água peptonada é usada como meio de pré-enriquecimento para a recuperação de microrganismos, mas não é seletiva ou diferencial.
- Se o objetivo for detectar microrganismos específicos como Salmonella, um meio seletivo posterior será necessário.
Essa é uma abordagem geral e pode variar conforme o tipo de amostra e o método de análise microbiológica.